Dijagnostičke pretrage rade u patološkoj laboratoriji liječnici specijalisti i naučnici. Uzorci tkiva može uključivati krvne pretrage i biopsiju tkiva. Ponekad će možda biti potrebno poslati uzorke tkiva u specijaliziranu laboratoriju u većoj bolnici da bi se uradili ovi testovi.
Čekanje na rezultate nekih od ovih testova ponekad može biti razlog odgađanja početka liječenja. Vrlo je važno da ljekari imaju sve informacije koje su im potrebne kako bi donijeli najbolju odluku o liječenju za pacijenta.
Zašto se rade dijagnostički testovi?
Postoji niz testova koji se rade da bi se potvrdila dijagnoza limfoma. Postoje doktori specijalisti koji su prošli posebnu obuku u ovoj oblasti za tumačenje ovih testova iz krvi, limfnih čvorova i uzoraka koštane srži za identifikaciju bolesti.
Kako naučnici više razumiju o limfomu, stvaraju se novi i osjetljiviji testovi kako bi se ljekari informirali o dijagnozi. Sve je važnije da se ovi testovi izvedu kako bi razumjeli vrstu i ponašanje limfoma prije nego što se odluče za pravi tretman za pacijenta.
U patološkoj laboratoriji uzorci tkiva će biti podvrgnuti brojnim testovima za klasifikaciju ćelija raka. Također gledaju pod mikroskopom svoj oblik, veličinu i kako su grupirani u uzorcima iz limfnih čvorova i koštane srži. Oni će uraditi dodatne testove kao što su imunofenotipizacija, citogenetska analiza i/ili molekularne studije kako bi saznali više informacija o tome kako se limfom može ponašati.
Šta je imunofenotipizacija?
Imunofenotipizacija je proces koji se koristi za razlikovanje različitih tipova ćelija. Na primjer, razlika između normalnih limfocita i ćelija limfoma. To radi otkrivanjem malih identifikacijskih supstanci, tzv 'markeri' or 'antigeni' koji su izraženi na ćelijama.
Imunofenotipizacija daje informacije o tipovima antigeni nalazi na ili unutar bela krvna zrnca (WBC). Ovaj test može pomoći u dijagnosticiranju i identifikaciji specifičnih vrsta limfoma. U nekim slučajevima, informacije mogu predvidjeti koliko je limfom agresivan ili koliko će reagirati na liječenje. Testiranje se može obaviti kako bi se vidjelo koliko je liječenje bilo efikasno i kako bi se potražila bilo kakva rezidualna ili rekurentna bolest.
Imunofenotipizacija se može uraditi na dvije metode. To uključuje test tzv imunohistohemija (IHC) ili protočna citometrija.
Imunohistohemija (IHC)
Imunofenotipizacija može se uraditi na dva načina. Imunohistohemija (IHC), ovo je mjesto gdje se mrlje primjenjuju na ćelije koje se nalaze na slajdu. Zatim se posmatraju pod mikroskopom. Mrlje će identificirati antigene ili markere prisutne na stanicama.
Protočna citometrija
Druga metoda je protočna citometrija. U ovom testu uzorak se obrađuje i dodaju se antitijela koja su označena fluorescentnim markerima. Ove antitela pričvrstiti na određeno antigeni kada su prisutni. Uzorak teče kroz instrument koji se zove a protočna citometrija gdje se analiziraju pojedinačne ćelije.
Protočna citometrija mjeri broj i postotak ćelija u uzorku krvi i karakteristike ćelija kao što su veličina, oblik i prisustvo biomarkera na površini ćelije. Protočna citometrija takođe može otkriti rezidualne nivoe bolesti nakon tretmana. Ovo pomaže doktoru da identifikuje recidiv bolesti i po potrebi ponovo započne liječenje.
Imunohistohemija (IHC)
- Tanke kriške uzorka biopsije (ili tanki slojevi tekućine) tretiraju se setovima antitijela koja prepoznaju različite markere koji se nalaze u različitim vrstama limfoma ili leukemijskih stanica i normalnih limfocita.
- Patolog ispituje stakalce pod mikroskopom kako bi potražio vidljivu promjenu boje koja se događa kada se antitijelo zalijepi za marker
- Patolog identificira i broji broj ćelija koje su označene bojom (što znači da su pozitivne na marker) sa svakim od različitih antitijela.
Protočna citometrija
- Ćelije iz uzorka biopsije se stavljaju u tečni rastvor i tretiraju setovima antitela koja prepoznaju različite antigene koji se nalaze u različitim tipovima ćelija limfoma.
- Mješavina stanica i antitijela se ubrizgava u instrument koji se zove protočni citometar. Ova mašina koristi laserske zrake da oseti različite boje koje ćelije emituju iz različitih antitela vezanih za njih. Ove informacije se mjere i analiziraju pomoću kompjutera i tumače od strane patologa.
Šta je citogenetska analiza?
Hromosomi sadrže gene koji se sastoje od dugih lanaca DNK. Zdrave ljudske ćelije imaju 23 para hromozoma. Hromozomi su podijeljeni u dvije regije nazvane 'ruke', koje se zovu p (kratka ruka) i q (duga krak). Neki limfomi i druge vrste raka imaju previše ili premalo hromozoma ili imaju hromozome sa abnormalnom strukturom. Najčešće hromozomi su slomljeni i ponovo spojeni (translokacije), tako da su dijelovi hromozoma pogrešno povezani što dovodi do aktivacije signala rasta tumora.
In citogenetički analiza, hromozomi iz ćelija raka se ispituju pod mikroskopom kako bi se proverilo da nema premalo ili previše hromozoma. Obično su potrebne dvije do tri sedmice da se dobiju rezultati citogenetskog testiranja jer se u laboratoriji mora uzgajati dovoljan broj ćelija raka da bi se dobilo dovoljno genetskog materijala za analizu.
Rezultati istraživanja citogenetska analiza takođe može pomoći u razlikovanju različite vrste of ne-Hodgkinov limfom ili pomoći u donošenju odluka o liječenju.
Koje su vrste hromozomskih abnormalnosti?
Jedna vrsta hromozomske abnormalnosti koja se nalazi u nekim tipovima limfoma naziva se translokacija, koji se javlja kada se dio hromozoma odvoji od svoje normalne lokacije i zakači se za drugi hromozom.
Druga vrsta hromozomske abnormalnosti naziva se a brisanje, što se dešava kada nedostaje dio hromozoma. Ovo je napisano, na primjer kao del(17p), uz napomenu da je došlo do delecije u kratkom kraku hromozoma 17.
Zašto bi pacijentu mogli biti potrebni dodatni genetski testovi?
Doktori mogu naručiti dodatne genetske testove kako bi potvrdili rezultate citogenetskih testova ili pronašli naše detaljnije informacije o vrstama oštećenja genetskih informacija ćelija limfoma.
Vrste dodatnih genetskih testova
Fluorescentna in situ hibridizacija (FISH)
- FISH koristi fluorescentne kemikalije da se specifično veže za određene dijelove hromozoma kako bi pokazao prisustvo translokacija i drugih velikih abnormalnosti.
- FISH pruža istraživačima način da vizualiziraju i mapiraju genetski materijal u ćelijama pojedinca, uključujući specifične gene ili dijelove gena. Ovo se može koristiti za razumijevanje raznih hromozomskih abnormalnosti i drugih genetskih mutacija.
- FISH se može izvesti na uzorcima krvi, limfnih čvorova ili koštane srži, a rezultati testa su obično dostupni u roku od nekoliko dana (brže od citogenetskog testiranja).
Lančana reakcija polimeraze (PCR)
- PCR je test koji se koristi za mjerenje specifičnih gena (tj. DNK) koji se ne mogu vidjeti pod mikroskopom.
- PCR testovi se mogu uraditi na vrlo maloj količini ćelija i obično je potrebno oko nedelju dana da se dobiju ovi rezultati.
DNK sekvenciranje
- Neke abnormalnosti u rastu tumora nastaju zbog promjena u sekvenci određenog gena ili skupa gena
- Ovi nalazi mogu pomoći u definiranju vrste tumora, određivanju prognoze ili utjecaju na izbor liječenja.
- Pojedinačni gen može biti sekvencioniran ili panel poznatih kritičnih gena može biti sekvenciran u jednom trenutku.
Kako će pacijent dobiti rezultate?
Ovo su visokospecijalizovana ispitivanja koja se rade samo u određenim laboratorijama. Hematolog će dobiti rezultate i interpretirati ih sa svim drugim rezultatima testova. Ovi testovi mogu potrajati malo vremena da se vrate, a neki testovi mogu potrajati nekoliko dana, a drugi mogu potrajati sedmicama.
Važno je dobiti neke od ovih informacija prije početka liječenja kako bi se osiguralo da se daje pravi tretman za pojedinačnog pacijenta. Važno je da pacijenti znaju da tumačenje dijagnostičkih testova treba obaviti između liječnika i pacijenta.
Šta izvještaj znači?
Neki pacijenti vole da pregledaju svoje pisane izveštaje; kada to radi, važno je da pacijent pažljivo pregleda nalaze sa svojim doktorom. To je zato što doktor često tumači mnoge rezultate različitih testova kako bi postavio informiranu dijagnozu.
Ovo je primjer nekih od CD markera za različite vrste ne-Hodgkinovih limfoma koje liječnici gledaju kako bi vidjeli koja je dijagnoza limfoma, pogledajte donju tabelu:
Napomena: Jedan od korisnih markera za dijagnozu Hodgkinovog limfoma je CD30
