Diagnostické testy jsou prováděny v patologické laboratoři odbornými lékaři a vědci. Tkáňové vzorky může zahrnovat krevní testy a tkáňové biopsie. Někdy může být nutné poslat vzorky tkáně do specializované laboratoře ve větší nemocnici, aby byly provedeny tyto testy.
Čekání na výsledky některých z těchto testů může být někdy důvodem pro odložení zahájení léčby. Je velmi důležité, aby lékaři měli všechny informace, které potřebují, aby mohli učinit pro pacienta nejlepší rozhodnutí o léčbě.
Proč se provádějí diagnostické testy?
K potvrzení diagnózy lymfomu se provádí řada testů. Existují specializovaní lékaři, kteří prošli speciálním školením v této oblasti, aby interpretovali tyto testy ze vzorků krve, lymfatických uzlin a kostní dřeně k identifikaci onemocnění.
Jak vědci více chápou lymfom, vznikají nové a citlivější testy, které mají lékaře informovat o diagnóze. Je stále důležitější, aby tyto testy byly prováděny tak, aby porozuměly typu a chování lymfomu před rozhodnutím o správné léčbě pro pacienta.
V patologické laboratoři budou vzorky tkáně podrobeny řadě testů ke klasifikaci rakovinných buněk. Pod mikroskopem se také dívají na jejich tvar, velikost a jak jsou seskupeny ve vzorcích z lymfatických uzlin a kostní dřeně. Provedou další testy, jako je imunofenotypizace, cytogenetická analýza a/nebo molekulární studie, aby zjistili více informací, které by naznačovaly, jak se lymfom může chovat.
Co je imunofenotypizace?
Imunofenotypizace je proces používaný k rozlišení mezi různými typy buněk. Například rozdíl mezi normálními lymfocyty a lymfomovými buňkami. Dělá to detekcí malých identifikačních látek, tzv 'markery' or 'antigeny' které jsou exprimovány na buňkách.
Imunofenotypizace poskytuje informace o typech antigeny nalezený na nebo uvnitř bílé krvinky (WBC). Tento test může pomoci diagnostikovat a identifikovat konkrétní typy lymfomu. V některých případech mohou informace předpovědět, jak agresivní je lymfom nebo jak bude reagovat na léčbu. Je možné provést testování, aby se zjistilo, jak účinná byla léčba, a aby se hledalo jakékoli reziduální nebo opakující se onemocnění.
Imunofenotypizaci lze provést dvěma způsoby. Mezi ně patří test tzv imunohistochemii (IHC) nebo průtokovou cytometrii.
Imunohistochemie (IHC)
Imunofenotypizace lze provést dvěma způsoby. Imunohistochemie (IHC), to je místo, kde jsou skvrny aplikovány na buňky, které jsou na sklíčku. Poté se na ně podívají pod mikroskopem. Barvy identifikují antigeny nebo markery přítomné na buňkách.
Průtoková cytometrie
Jiná metoda je průtoková cytometrie. V tomto testu se vzorek zpracuje a přidají se protilátky, které jsou označeny fluorescenčními markery. Tyto protilátky připojit ke konkrétnímu antigeny když jsou přítomni. Vzorek protéká přístrojem zvaným a průtoková cytometrie kde se analyzují jednotlivé buňky.
Průtoková cytometrie měří počet a procento buněk ve vzorku krve a charakteristiky buněk, jako je velikost, tvar a přítomnost biomarkerů na buněčném povrchu. Průtoková cytometrie může také detekovat reziduální úrovně onemocnění po léčbě. To pomáhá lékaři identifikovat relaps onemocnění a podle potřeby znovu zahájit léčbu.
Imunohistochemie (IHC)
- Tenké plátky vzorku biopsie (nebo tenké vrstvy tekutiny) jsou ošetřeny sadami protilátek, které rozpoznávají různé markery nalezené v různých typech lymfomů nebo leukemických buněk a normálních lymfocytech.
- Patolog zkoumá sklíčka pod mikroskopem, aby hledal viditelnou změnu barvy, ke které dojde, když se protilátka přilepí na marker
- Patolog identifikuje a spočítá počet buněk, které jsou zvýrazněny barvou (což znamená, že jsou pozitivní na marker) s každou z různých protilátek.
Průtoková cytometrie
- Buňky z bioptického vzorku jsou umístěny do kapalného roztoku a ošetřeny sadami protilátek, které rozpoznávají různé antigeny nalezené v různých typech buněk lymfomu.
- Směs buňka-protilátka se vstříkne do přístroje zvaného průtokový cytometr. Tento stroj používá laserové paprsky ke snímání různých barev, které buňky vyzařují z různých protilátek, které jsou k nim připojeny. Tyto informace jsou měřeny a analyzovány počítačem a interpretovány patologem.
Co je cytogenetická analýza?
Chromosomes obsahují geny, které obsahují dlouhé řetězce DNA. Zdravé lidské buňky mají 23 párů chromozomů. Chromozomy jsou rozděleny do dvou oblastí nazývaných „ramena“, které se nazývají p (krátké rameno) a q (dlouhé rameno). Některé lymfomy a jiné typy rakoviny mají příliš mnoho nebo příliš málo chromozomů nebo mají chromozomy s abnormální strukturou. Nejčastěji chromozomy jsou rozbité a znovu připojené (translokace), takže kusy chromozomů jsou nesprávně spojeny, což vede k aktivaci signálů růstu nádoru.
In cytogenetické analýza, jsou chromozomy z rakovinných buněk vyšetřovány pod mikroskopem, aby se zjistilo, zda není příliš málo nebo příliš mnoho chromozomů. Získat výsledky z cytogenetického testování obvykle trvá dva až tři týdny, protože v laboratoři musí být vypěstován dostatečný počet rakovinných buněk, aby se získal dostatek genetického materiálu pro analýzu.
Výsledky cytogenetickou analýzu může také pomoci rozlišovat mezi odlišné typy of non-Hodgkinův lymfom nebo pomoci při rozhodování o léčbě.
Jaké jsou typy chromozomálních abnormalit?
Jeden typ chromozomální abnormality nalezený u některých typů lymfomů se nazývá translokace, ke kterému dochází, když se část chromozomu odlomí ze svého normálního umístění a připojí se k jinému chromozomu.
Další typ chromozomální abnormality se nazývá a vymazání, což se stane, když část chromozomu chybí. To je napsáno například jako del(17p) s poznámkou, že došlo k deleci v krátkém rameni chromozomu 17.
Proč může pacient potřebovat další genetické testy?
Lékaři mohou objednat další genetické testy, aby potvrdili výsledky cytogenetických testů nebo zjistili naše podrobnější informace o typech poškození genetické informace buněk lymfomu.
Typy doplňkových genetických testů
Fluorescenční in situ hybridizace (FISH)
- FISH používá fluorescenční chemikálie ke specifickému připojení k určitým částem chromozomů, aby ukázaly přítomnost translokací a jiných velkých abnormalit.
- FISH poskytuje výzkumníkům způsob, jak vizualizovat a mapovat genetický materiál v buňkách jednotlivce, včetně specifických genů nebo částí genů. To může být použito pro pochopení různých chromozomálních abnormalit a dalších genetických mutací.
- FISH lze provádět na vzorcích krve, lymfatických uzlin nebo kostní dřeně a výsledky testů jsou obvykle k dispozici během několika dnů (rychlejší než cytogenetické testování).
Polymerázová řetězová reakce (PCR)
- PCR je test, který se používá k měření specifických genů (tj. DNA), které nelze vidět pod mikroskopem.
- Testy PCR lze provést na velmi malém množství buněk a získání těchto výsledků obvykle trvá přibližně jeden týden.
DNA sekvenování
- Některé abnormality v růstu nádoru se vyskytují v důsledku změn v sekvenci specifického genu nebo sady genů
- Tyto nálezy mohou pomoci definovat typ nádoru, určit prognózu nebo ovlivnit volbu léčby.
- Jednotlivý gen může být sekvenován nebo může být sekvenován panel známých kritických genů najednou.
Jak se pacient dostane k výsledkům?
Jedná se o vysoce specializované testy prováděné pouze v určitých laboratořích. Hematolog získá výsledky a interpretuje je se všemi ostatními výsledky testů. Tyto testy mohou chvíli trvat, než se vrátí, a některé testy mohou trvat několik dní a jiné týdny.
Je důležité získat některé z těchto informací před zahájením léčby, aby bylo zajištěno, že je pro jednotlivého pacienta podávána správná léčba. Je důležité, aby pacienti věděli, že interpretace diagnostických testů by měla probíhat mezi lékařem a pacientem.
Co znamená zpráva?
Někteří pacienti rádi přezkoumávají své písemné zprávy; při tom je důležité, aby pacient pečlivě projednal nález se svým lékařem. Je to proto, že lékař často interpretuje mnoho výsledků z různých testů, aby stanovil informovanou diagnózu.
Toto je příklad některých CD markerů pro různé typy non-Hodgkinských lymfomů, na které se lékaři podívají, aby zjistili, jaká je diagnóza lymfomu, viz tabulka níže:
Poznámka: Jedním z užitečných markerů pro diagnostiku Hodgkinova lymfomu je CD30
