Diagnostiske tests udføres i patologilaboratoriet af speciallæger og videnskabsmænd. Vævsprøver kan omfatte blodprøver og vævsbiopsier. Nogle gange kan det være nødvendigt at sende vævsprøver til et specialistlaboratorium på et større hospital for at disse tests kan udføres.
At vente på resultaterne af nogle af disse tests kan nogle gange være årsagen til, at starten af behandlingen bliver forsinket. Det er meget vigtigt, at lægerne har al den information, de har brug for, for at træffe de bedste behandlingsbeslutninger for patienten.
Hvorfor udføres diagnostiske tests?
Der er en række tests, der udføres for at bekræfte diagnosen lymfom. Der er speciallæger, der har gennemgået en særlig uddannelse på dette område til at fortolke disse tests fra blod, lymfeknuder og knoglemarvsprøver for at identificere sygdom.
Efterhånden som forskerne forstår mere om lymfom, bliver der lavet nye og mere følsomme tests for at informere lægerne om diagnosen. Det bliver mere og mere vigtigt, at disse tests udføres, så de forstår lymfomets type og adfærd, før de beslutter sig for den rigtige behandling for patienten.
I patologilaboratoriet vil vævsprøverne gennemgå en række tests for at klassificere kræftcellerne. De ser også på deres form, deres størrelse og hvordan de er grupperet i prøver fra lymfeknuder og knoglemarv ved at kigge under mikroskopet. De vil lave yderligere tests såsom immunfænotypning, cytogenetisk analyse og/eller molekylære undersøgelser for at finde ud af mere information for at indikere, hvordan lymfomet kan opføre sig.
Hvad er immunfænotyping?
Immunfænotypning er en proces, der bruges til at skelne mellem forskellige typer celler. For eksempel forskellen mellem normale lymfocytter og lymfomceller. Det gør den ved at opdage små identificerende stoffer, kaldet 'markører' or 'antigener' der kommer til udtryk på cellerne.
Immunfænotyping giver information om typerne af antigener findes på eller indeni hvide blodlegemer (WBC'er). Denne test kan hjælpe med at diagnosticere og identificere specifikke typer lymfom. I nogle tilfælde kan informationen forudsige, hvor aggressivt et lymfom er, eller hvor responsivt det vil være over for behandling. Test kan udføres for at se, hvor effektiv behandlingen har været, og for at se efter eventuelle resterende eller tilbagevendende sygdom.
Immunfænotypning kan udføres gennem to metoder. Disse omfatter en test kaldet immunhistokemi (IHC) eller flowcytometri.
Immunhistokemi (IHC)
Immunfænotypning kan gøres på to måder. Immunhistokemi (IHC), det er her pletter påføres celler, der er på et objektglas. Derefter ses de under mikroskopet. Pletterne vil identificere de antigener eller markører, der er til stede på cellerne.
Flowcytometri
Den anden metode er flowcytometri. I denne test behandles prøven, og antistoffer, der er mærket med fluorescerende markører, tilføjes. Disse antistoffer knytte til specifikke antigener når de er til stede. Prøven strømmer gennem et instrument kaldet a flowcytometri hvor individuelle celler analyseres.
Flowcytometri måler antallet og procentdelen af celler i en blodprøve og cellekarakteristika såsom størrelse, form og tilstedeværelsen af biomarkører på celleoverfladen. Flowcytometri kan også påvise resterende sygdomsniveauer efter behandling. Dette hjælper lægen med at identificere sygdomstilbagefald og genstarte behandlingen efter behov.
Immunhistokemi (IHC)
- Tynde skiver af biopsiprøven (eller tynde lag af væske) behandles med sæt antistoffer, der genkender forskellige markører, der findes i forskellige typer lymfomer eller leukæmiceller og normale lymfocytter.
- Patologen undersøger objektglassene under et mikroskop for at se efter den synlige farveændring, der sker, når antistoffet klæber til markøren
- Patologen identificerer og tæller antallet af celler, der er fremhævet med farve (hvilket betyder, at de er positive for markøren) med hvert af de forskellige antistoffer.
Flowcytometri
- Celler fra biopsiprøven anbringes i en flydende opløsning og behandles med sæt antistoffer, der genkender forskellige antigener, der findes i forskellige typer lymfomceller.
- Celle-antistofblandingen injiceres i et instrument kaldet et flowcytometer. Denne maskine bruger laserstråler til at mærke de forskellige farver, cellerne udsender fra de forskellige antistoffer, der er knyttet til dem. Denne information måles og analyseres af en computer og fortolkes af en patolog.
Hvad er cytogenetisk analyse?
Kromosomer indeholder gener, der omfatter lange DNA-strenge. Sunde menneskeceller har 23 par kromosomer. Kromosomer er opdelt i to områder kaldet 'arme', som kaldes p (den korte arm) og q (den lange arm). Nogle lymfomer og andre former for kræft har for mange eller for få kromosomer eller har kromosomer med en unormal struktur. Mest almindeligt kromosomer er i stykker og sat på igen (translokationer), således at kromosomstykker er forkert forbundet, hvilket fører til aktivering af tumorvækstsignaler.
In cytogenetisk analyse, undersøges kromosomer fra kræftceller i mikroskop for at kontrollere, at der ikke er for få eller for mange kromosomer. Det tager normalt to til tre uger at få resultater fra cytogenetisk test, fordi der skal dyrkes et tilstrækkeligt antal kræftceller i laboratoriet for at få nok genetisk materiale til analysen.
Resultaterne af cytogenetisk analyse kan også hjælpe med at skelne mellem forskellige typer of ikke-Hodgkin-lymfom eller hjælp til at træffe behandlingsbeslutninger.
Hvilke typer kromosomafvigelser er der?
En type kromosomal abnormitet fundet i nogle lymfomtyper kaldes translokation, som opstår, når en del af et kromosom brækker fra sin normale placering og bliver knyttet til et andet kromosom.
En anden type kromosomabnormitet kaldes a sletning, hvilket sker, når en del af et kromosom mangler. Dette er skrevet, for eksempel som del(17p), og bemærker, at der var en deletion i den korte arm af kromosom 17.
Hvorfor kan en patient have brug for yderligere genetiske tests?
Læger kan bestille yderligere genetiske tests for at bekræfte resultaterne af cytogenetiske tests eller for at finde vores mere detaljerede oplysninger om typerne af skader på lymfomcellernes genetiske information.
Typer af yderligere genetiske tests
Fluorescens in situ hybridisering (FISH)
- FISH bruger fluorescerende kemikalier til specifikt at binde sig til visse dele af kromosomerne for at vise tilstedeværelsen af translokationer og andre store abnormiteter.
- FISH giver forskere en måde at visualisere og kortlægge genetisk materiale i et individs celler, herunder specifikke gener eller dele af gener. Dette kan bruges til at forstå en række kromosomale abnormiteter og andre genetiske mutationer.
- FISH kan udføres på blod-, lymfeknuder- eller knoglemarvsprøver, og testresultater er normalt tilgængelige inden for et par dage (hurtigere end cytogenetisk testning).
Polymerasekædereaktion (PCR)
- PCR er en test, der bruges til at måle specifikke gener (dvs. DNA), som ikke kan ses under et mikroskop.
- PCR-tests kan udføres på en meget lille mængde celler, og det tager normalt omkring en uge at få disse resultater.
DNA-sekventering
- Nogle abnormiteter i tumorvækst opstår på grund af ændringer i sekvensen af et specifikt gen eller sæt af gener
- Disse fund kan hjælpe med at definere typen af tumor, bestemme prognosen eller påvirke behandlingsvalget.
- Et individuelt gen kan sekventeres, eller et panel af kendte kritiske gener kan sekventeres på én gang.
Hvordan får en patient deres resultater?
Disse er højt specialiserede test udført kun på visse laboratorier. Hæmatologen vil få resultaterne og fortolke disse med alle de andre testresultater. Disse tests kan tage lidt tid at komme tilbage, og nogle test kan tage et par dage, og andre kan tage uger.
Det er vigtigt at få nogle af disse informationer inden behandlingen kan starte for at sikre, at den rigtige behandling gives til den enkelte patient. Det er vigtigt for patienterne at vide, at fortolkning af diagnostiske tests bør foretages mellem lægen og patienten.
Hvad betyder rapporten?
Nogle patienter kan lide at gennemgå deres skriftlige rapporter; når man gør det, er det vigtigt for patienten omhyggeligt at gennemgå resultaterne med sin læge. Dette skyldes, at lægen ofte tolker mange resultater fra forskellige tests for at stille en informeret diagnose.
Dette er et eksempel på nogle af de CD-markører for forskellige typer non-Hodgkin lymfomer, som lægerne ser på for at se, hvad diagnosen lymfom er, se tabellen nedenfor:
Bemærk: En af de nyttige markører for diagnosen Hodgkin lymfom er CD30
