I test diagnostici vengono eseguiti nel laboratorio di patologia da medici e scienziati specializzati. Campioni di tessuto può includere esami del sangue e biopsie tissutali. A volte potrebbe essere necessario inviare campioni di tessuto a un laboratorio specializzato in un ospedale più grande per eseguire questi test.
L'attesa dei risultati di alcuni di questi test può talvolta essere il motivo per ritardare l'inizio del trattamento. È molto importante che i medici dispongano di tutte le informazioni di cui hanno bisogno per prendere le migliori decisioni terapeutiche per il paziente.
Perché vengono eseguiti i test diagnostici?
Esistono numerosi test che vengono eseguiti per confermare la diagnosi di linfoma. Ci sono medici specialisti che hanno seguito una formazione specifica in quest'area per interpretare questi test da campioni di sangue, linfonodi e midollo osseo per identificare la malattia.
Man mano che gli scienziati capiscono di più sul linfoma, vengono creati test nuovi e più sensibili per informare i medici sulla diagnosi. Sta diventando sempre più importante eseguire questi test in modo che comprendano il tipo e il comportamento del linfoma prima di decidere il trattamento giusto per il paziente.
Nel laboratorio di patologia i campioni di tessuto saranno sottoposti a una serie di test per classificare le cellule tumorali. Osservano anche la loro forma, le loro dimensioni e il modo in cui sono raggruppati in campioni di linfonodi e midollo osseo, guardando al microscopio. Faranno test aggiuntivi come immunofenotipizzazione, analisi citogenetica e/o studi molecolari per trovare maggiori informazioni per indicare come può comportarsi il linfoma.
Cos'è l'immunofenotipizzazione?
Immunofenotipizzazione è un processo utilizzato per distinguere tra diversi tipi di cellule. Ad esempio, la differenza tra linfociti normali e cellule di linfoma. Lo fa rilevando piccole sostanze identificative, chiamate "marcatori" or 'antigeni' che sono espressi sulle cellule.
L'immunofenotipizzazione fornisce informazioni sui tipi di antigeni trovato su o all'interno globuli bianchi (globuli bianchi). Questo test può aiutare a diagnosticare e identificare tipi specifici di linfoma. In alcuni casi, le informazioni possono prevedere quanto sia aggressivo un linfoma o quanto sarà reattivo al trattamento. È possibile eseguire test per verificare l'efficacia del trattamento e per cercare eventuali malattie residue o ricorrenti.
L'immunofenotipizzazione può essere eseguita attraverso due metodi. Questi includono un test chiamato immunoistochimica (IHC) o citometria a flusso.
Immunoistochimica (IHC)
Immunofenotipizzazione può essere fatto attraverso due metodi. Immunoistochimica (IHC), è qui che le macchie vengono applicate alle cellule che si trovano su un vetrino. Vengono quindi osservati al microscopio. Le macchie identificheranno gli antigeni o marcatori presenti sulle cellule.
Citometria a flusso
L'altro metodo è citometria a flusso. In questo test il campione viene elaborato e vengono aggiunti gli anticorpi contrassegnati con marcatori fluorescenti. Questi anticorpi allegare a specifico antigeni quando sono presenti. Il campione scorre attraverso uno strumento chiamato a citometria a flusso dove vengono analizzate le singole cellule.
Citometria a flusso misura il numero e la percentuale di cellule in un campione di sangue e le caratteristiche delle cellule come dimensioni, forma e presenza di biomarcatori sulla superficie cellulare. La citometria a flusso può anche rilevare livelli residui di malattia dopo il trattamento. Questo aiuta il medico a identificare le ricadute della malattia e a ricominciare il trattamento secondo necessità.
Immunoistochimica (IHC)
- Fette sottili del campione bioptico (o sottili strati di fluido) vengono trattate con set di anticorpi che riconoscono diversi marcatori trovati in diversi tipi di linfoma o cellule leucemiche e linfociti normali.
- Il patologo esamina i vetrini al microscopio per cercare il cambiamento di colore visibile che si verifica quando l'anticorpo si attacca al marcatore
- Il patologo identifica e conta il numero di cellule che sono evidenziate dal colore (nel senso che sono positive per il marcatore) con ciascuno dei diversi anticorpi.
Citometria a flusso
- Le cellule del campione bioptico vengono poste in una soluzione liquida e trattate con set di anticorpi che riconoscono diversi antigeni trovati in diversi tipi di cellule di linfoma.
- La miscela cellula-anticorpo viene iniettata in uno strumento chiamato citometro a flusso. Questa macchina utilizza raggi laser per rilevare i diversi colori che le cellule emettono dai diversi anticorpi ad esse attaccati. Queste informazioni vengono misurate e analizzate da un computer e interpretate da un patologo.
Cos'è l'analisi citogenetica?
Cromosomi contengono geni che comprendono lunghi filamenti di DNA. Le cellule umane sane hanno 23 paia di cromosomi. I cromosomi sono divisi in due regioni chiamate "braccia", chiamate p (braccio corto) e q (braccio lungo). Alcuni linfomi e altri tipi di cancro hanno troppi o troppo pochi cromosomi oppure hanno cromosomi con una struttura anomala. Più comunemente cromosomi sono rotti e riattaccati (traslocazioni), in modo che i pezzi cromosomici siano collegati in modo errato portando all'attivazione dei segnali di crescita del tumore.
In citogenetico ., i cromosomi delle cellule tumorali vengono esaminati al microscopio per verificare che non vi siano né troppi né troppi cromosomi. Di solito occorrono dalle due alle tre settimane per ottenere risultati dai test citogenetici perché in laboratorio deve essere coltivato un numero sufficiente di cellule tumorali per ottenere materiale genetico sufficiente per l'analisi.
I risultati della analisi citogenetica può anche aiutare a distinguere tra tipi diversi of linfoma non Hodgkin o aiutare a prendere decisioni terapeutiche.
Quali sono i tipi di anomalie cromosomiche?
Viene chiamato un tipo di anomalia cromosomica riscontrata in alcuni tipi di linfoma traslocazione, che si verifica quando una parte di un cromosoma si stacca dalla sua posizione normale e si attacca a un altro cromosoma.
Un altro tipo di anomalia cromosomica è chiamato a cancellazione, che accade quando manca una parte di un cromosoma. Questo è scritto, ad esempio, come del(17p), notando che c'era una delezione nel braccio corto del cromosoma 17.
Perché un paziente potrebbe aver bisogno di ulteriori test genetici?
I medici possono ordinare ulteriori test genetici per confermare i risultati dei test citogenetici o per trovare informazioni più dettagliate sui tipi di danno alle informazioni genetiche delle cellule del linfoma.
Tipi di test genetici aggiuntivi
Ibridazione in situ fluorescente (FISH)
- FISH utilizza sostanze chimiche fluorescenti per attaccarsi specificamente a determinate parti dei cromosomi per mostrare la presenza di traslocazioni e altre grandi anomalie.
- FISH offre ai ricercatori un modo per visualizzare e mappare il materiale genetico nelle cellule di un individuo, inclusi geni specifici o porzioni di geni. Questo può essere utilizzato per comprendere una varietà di anomalie cromosomiche e altre mutazioni genetiche.
- La FISH può essere eseguita su campioni di sangue, linfonodi o midollo osseo e i risultati dei test sono generalmente disponibili entro pochi giorni (più rapidi dei test citogenetici).
Reazione a catena della polimerasi (PCR)
- La PCR è un test utilizzato per misurare geni specifici (ad es. DNA) che non possono essere visti al microscopio.
- I test PCR possono essere eseguiti su una quantità molto piccola di cellule e di solito ci vuole circa una settimana per ottenere questi risultati.
Sequenziamento del DNA
- Alcune anomalie nella crescita del tumore si verificano a causa di cambiamenti nella sequenza di un gene specifico o di un insieme di geni
- Questi risultati possono aiutare a definire il tipo di tumore, determinare la prognosi o influenzare la scelta del trattamento.
- Un singolo gene può essere sequenziato o un pannello di geni critici noti può essere sequenziato contemporaneamente.
In che modo un paziente otterrà i risultati?
Si tratta di test altamente specializzati eseguiti solo presso determinati laboratori. L'ematologo otterrà i risultati e li interpreterà con tutti gli altri risultati del test. Questi test potrebbero richiedere un po' di tempo per tornare e alcuni test possono richiedere alcuni giorni e altri possono richiedere settimane.
È importante ottenere alcune di queste informazioni prima che il trattamento possa iniziare per garantire che venga somministrato il trattamento giusto per il singolo paziente. È importante che i pazienti sappiano che l'interpretazione dei test diagnostici deve essere effettuata tra il medico e il paziente.
Cosa significa il rapporto?
Ad alcuni pazienti piace rivedere i loro rapporti scritti; in tal caso, è importante che il paziente esamini attentamente i risultati con il proprio medico. Questo perché spesso il medico interpreta molti risultati di diversi test per fare una diagnosi informata.
Questo è un esempio di alcuni dei marcatori CD per diversi tipi di linfomi non Hodgkin che i medici esaminano per vedere quale sia la diagnosi di linfoma, vedere la tabella seguente:
Nota: uno dei marcatori utili per la diagnosi del linfoma di Hodgkin è il CD30
