Diagnostické testy vykonávajú v patologickom laboratóriu špecializovaní lekári a vedci. Vzorky tkanív môže zahŕňať krvné testy a biopsie tkaniva. Niekedy môže byť potrebné zaslať vzorky tkaniva do špecializovaného laboratória vo väčšej nemocnici na vykonanie týchto testov.
Čakanie na výsledky niektorých z týchto testov môže byť niekedy dôvodom oneskorenia začiatku liečby. Je veľmi dôležité, aby lekári mali všetky informácie, ktoré potrebujú, aby mohli urobiť pre pacienta najlepšie rozhodnutia o liečbe.
Prečo sa robia diagnostické testy?
Existuje množstvo testov, ktoré sa robia na potvrdenie diagnózy lymfómu. Existujú špecializovaní lekári, ktorí prešli špeciálnym školením v tejto oblasti na interpretáciu týchto testov zo vzoriek krvi, lymfatických uzlín a kostnej drene na identifikáciu ochorenia.
Keďže vedci viac rozumejú lymfómu, vznikajú nové a citlivejšie testy, aby lekárov informovali o diagnóze. Je stále dôležitejšie, aby sa tieto testy vykonávali, aby pochopili typ a správanie lymfómu pred rozhodnutím o správnej liečbe pre pacienta.
V patologickom laboratóriu sa vzorky tkaniva podrobia niekoľkým testom na klasifikáciu rakovinových buniek. Pozerajú sa aj na ich tvar, veľkosť a ako sú zoskupené vo vzorkách z lymfatických uzlín a kostnej drene pri pohľade pod mikroskop. Vykonajú ďalšie testy, ako je imunofenotypizácia, cytogenetická analýza a / alebo molekulárne štúdie, aby zistili viac informácií, ktoré naznačujú, ako sa lymfóm môže správať.
Čo je imunofenotypizácia?
Imunofenotypizácia je proces používaný na rozlíšenie medzi rôznymi typmi buniek. Napríklad rozdiel medzi normálnymi lymfocytmi a lymfómovými bunkami. Robí to detekciou malých identifikačných látok, tzv "markery" or 'antigény' ktoré sú exprimované na bunkách.
Imunofenotypizácia poskytuje informácie o typoch antigény nájdené na alebo v rámci biele krvinky (WBC). Tento test môže pomôcť diagnostikovať a identifikovať špecifické typy lymfómu. V niektorých prípadoch môžu informácie predpovedať, aký agresívny je lymfóm alebo ako bude reagovať na liečbu. Môže sa vykonať testovanie, aby sa zistilo, aká účinná bola liečba, a aby sa zistilo akékoľvek reziduálne alebo opakujúce sa ochorenie.
Imunofenotypizácia sa môže uskutočniť dvoma spôsobmi. Medzi ne patrí test tzv imunohistochémia (IHC) alebo prietoková cytometria.
Imunohistochémia (IHC)
Imunofenotypizácia možno vykonať dvoma spôsobmi. Imunohistochémia (IHC), to je miesto, kde sa škvrny aplikujú na bunky, ktoré sú na sklíčku. Potom sa na ne pozerajú pod mikroskopom. Farby identifikujú antigény alebo markery prítomné na bunkách.
Prietoková cytometria
Ďalšia metóda je prietoková cytometria. V tomto teste sa vzorka spracuje a pridajú sa protilátky, ktoré sú označené fluorescenčnými markermi. Títo protilátky pripojiť ku konkrétnemu antigény keď sú prítomní. Vzorka preteká cez prístroj nazývaný a prietoková cytometria kde sa analyzujú jednotlivé bunky.
Prietoková cytometria meria počet a percento buniek vo vzorke krvi a charakteristiky buniek, ako je veľkosť, tvar a prítomnosť biomarkerov na bunkovom povrchu. Prietoková cytometria môže tiež odhaliť zvyškové hladiny ochorenia po liečbe. To pomáha lekárovi identifikovať relaps ochorenia a podľa potreby znovu začať liečbu.
Imunohistochémia (IHC)
- Tenké plátky vzorky biopsie (alebo tenké vrstvy tekutiny) sú ošetrené súbormi protilátok, ktoré rozpoznávajú rôzne markery nachádzajúce sa v rôznych typoch lymfómových alebo leukemických buniek a normálnych lymfocytov.
- Patológ skúma sklíčka pod mikroskopom, aby zistil viditeľnú zmenu farby, ku ktorej dochádza, keď sa protilátka prilepí na marker
- Patológ identifikuje a spočíta počet buniek, ktoré sú zvýraznené farbou (to znamená, že sú pozitívne na marker) s každou z rôznych protilátok.
Prietoková cytometria
- Bunky zo vzorky biopsie sa umiestnia do tekutého roztoku a ošetria sa sadami protilátok, ktoré rozpoznávajú rôzne antigény nachádzajúce sa v rôznych typoch buniek lymfómu.
- Zmes bunka-protilátka sa vstrekuje do prístroja nazývaného prietokový cytometer. Tento stroj využíva laserové lúče na snímanie rôznych farieb, ktoré bunky vyžarujú z rôznych protilátok, ktoré sú k nim pripojené. Tieto informácie sú merané a analyzované počítačom a interpretované patológom.
Čo je cytogenetická analýza?
chromozómy obsahujú gény, ktoré obsahujú dlhé reťazce DNA. Zdravé ľudské bunky majú 23 párov chromozómov. Chromozómy sú rozdelené do dvoch oblastí nazývaných „ramená“, ktoré sa nazývajú p (krátke rameno) a q (dlhé rameno). Niektoré lymfómy a iné typy rakoviny majú príliš veľa alebo príliš málo chromozómov alebo majú chromozómy s abnormálnou štruktúrou. Najčastejšie chromozómy sú zlomené a znovu pripojené (translokácie), takže kúsky chromozómov sú nesprávne spojené, čo vedie k aktivácii signálov rastu nádoru.
In cytogenetické analýza, sa chromozómy z rakovinových buniek skúmajú pod mikroskopom, aby sa skontrolovalo, či nie je príliš málo alebo príliš veľa chromozómov. Získanie výsledkov z cytogenetického testovania zvyčajne trvá dva až tri týždne, pretože v laboratóriu musí byť vypestovaný dostatočný počet rakovinových buniek, aby sa získal dostatok genetického materiálu na analýzu.
Výsledky cytogenetickú analýzu môže tiež pomôcť rozlíšiť medzi odlišné typy of non-Hodgkinov lymfóm alebo pomoc pri rozhodovaní o liečbe.
Aké sú typy chromozomálnych abnormalít?
Jeden typ chromozomálnej abnormality zistený u niektorých typov lymfómov sa nazýva tzv premiestnenie, ku ktorému dochádza, keď sa časť chromozómu odlomí zo svojej normálnej polohy a pripojí sa k inému chromozómu.
Iný typ chromozomálnej abnormality sa nazýva a vymazanie, čo sa stane, keď časť chromozómu chýba. Toto je napísané napríklad ako del(17p), pričom sa uvádza, že došlo k delécii v krátkom ramene chromozómu 17.
Prečo môže pacient potrebovať ďalšie genetické testy?
Lekári si môžu objednať ďalšie genetické testy na potvrdenie výsledkov cytogenetických testov alebo na zistenie našich podrobnejších informácií o typoch poškodenia genetickej informácie buniek lymfómu.
Druhy dodatočných genetických testov
Fluorescenčná in situ hybridizácia (FISH)
- FISH používa fluorescenčné chemikálie na špecifické pripojenie k určitým častiam chromozómov, aby preukázali prítomnosť translokácií a iných veľkých abnormalít.
- FISH poskytuje výskumníkom spôsob, ako vizualizovať a mapovať genetický materiál v bunkách jednotlivca, vrátane špecifických génov alebo častí génov. To môže byť použité na pochopenie rôznych chromozomálnych abnormalít a iných genetických mutácií.
- FISH je možné vykonať na vzorkách krvi, lymfatických uzlín alebo kostnej drene a výsledky testov sú zvyčajne dostupné v priebehu niekoľkých dní (rýchlejšie ako cytogenetické testovanie).
Polymerázová reťazová reakcia (PCR)
- PCR je test, ktorý sa používa na meranie špecifických génov (tj DNA), ktoré nie je možné vidieť pod mikroskopom.
- Testy PCR je možné vykonať na veľmi malom množstve buniek a získanie týchto výsledkov zvyčajne trvá približne jeden týždeň.
DNA sekvenovanie
- Niektoré abnormality v raste nádoru sa vyskytujú v dôsledku zmien v sekvencii špecifického génu alebo súboru génov
- Tieto zistenia môžu pomôcť definovať typ nádoru, určiť prognózu alebo ovplyvniť výber liečby.
- Jednotlivý gén môže byť sekvenovaný alebo panel známych kritických génov môže byť sekvenovaný naraz.
Ako sa pacient dostane k výsledkom?
Ide o vysoko špecializované testy vykonávané len v určitých laboratóriách. Hematológ dostane výsledky a interpretuje ich so všetkými ostatnými výsledkami testov. Tieto testy môžu chvíľu trvať, kým sa vrátia a niektoré testy môžu trvať niekoľko dní a iné môžu trvať týždne.
Je dôležité získať niektoré z týchto informácií pred začatím liečby, aby sa zaistilo, že sa pre konkrétneho pacienta podáva správna liečba. Je dôležité, aby pacienti vedeli, že interpretácia diagnostických testov by mala prebiehať medzi lekárom a pacientom.
Čo znamená správa?
Niektorí pacienti si radi prezerajú svoje písomné správy; pri tom je dôležité, aby si pacient pozorne preštudoval nálezy so svojím lekárom. Je to preto, že lekár často interpretuje mnohé výsledky z rôznych testov, aby urobil informovanú diagnózu.
Toto je príklad niektorých CD markerov pre rôzne typy non-Hodgkinových lymfómov, na ktoré sa lekári pozerajú, aby zistili, aká je diagnóza lymfómu, pozri tabuľku nižšie:
Poznámka: Jedným z užitočných markerov na diagnostiku Hodgkinovho lymfómu je CD30
